Принадлежности для пептидов: Бактериостатическая вода, шприцы и иглы
Всё для пептидных исследований: Бактериостатическая вода для реконституции, шприцы, иглы и принадлежности. Инструкция по правильной реконституции пептидов.
Кто хоть раз держал в руках дорогой пептидный флакон и потом обнаружил, что нет стерильного растворителя, тот знает это чувство. Сам пептид может быть сколь угодно чистым - без правильных принадлежностей он останется бесполезным порошком в стеклянном флаконе. Поэтому на принадлежностях не стоит экономить и прежде всего - ничего не забывать.
Бактериостатическая вода: центральный растворитель
Стерильная вода фармакопейного качества с 0,9% бензилового спирта - стандартный растворитель для восстановления лиофилизированных пептидов. Незаменимый аксессуар. Каждый флакон герметично запечатан и готов к использованию.
Бактериостатическая вода (сокращённо BacWater) - это стерильная вода, в которую добавлено 0,9 % бензилового спирта. Эта добавка подавляет рост микроорганизмов и представляет собой решающее отличие от обычной стерильной воды (Water for Injection, WFI): из флакона можно забирать многократно без контаминации раствора. В случае WFI флакон после первого прокола практически использован.
Все лиофилизированные - то есть высушенные замораживанием - пептиды перед использованием должны быть переведены в раствор. Этот процесс называется реконституцией, и BacWater является для этого стандартным средством.
Сравнение растворителей
Бактериостатическая вода стерильна, содержит бензиловый спирт в качестве консерванта и позволяет многократный забор в течение до 28 дней. Совместимость с пептидами превосходная.
Стерильная вода (WFI) также стерильна, но не содержит консерванта. После вскрытия должна быть использована немедленно. Совместимость с пептидами хорошая, но отсутствие срока годности после вскрытия является проблемой при многократном заборе.
NaCl 0,9 % стерилен, но не имеет ни консерванта, ни пригодности для многократного забора. Совместимость с пептидами ограничена - некоторые пептиды агрегируют в физрастворе.
Рекомендация
Для подавляющего большинства исследовательских проектов бактериостатическая вода - просто самый безопасный выбор.
Реконституция пептидов: Пошагово
Реконституция звучит просто, но имеет свои подводные камни. Кто здесь работает небрежно, рискует в лучшем случае искажённой концентрацией, в худшем - разрушенным пептидом.
Не встряхивайте!
Никогда не направляйте воду прямо на порошок и не встряхивайте флакон. И то, и другое может повредить структуру пептида. Вместо этого медленно пустите воду стекать по внутренней стенке и осторожно покачивайте флакон.
Расчёт концентрации
Формула проста: Количество пептида (мг), делённое на количество воды (мл) = концентрация (мг/мл).
Пример: 5 мг BPC-157, растворённых в 2 мл BacWater, дают 2,5 мг/мл. В 0,1 мл этого раствора содержится 250 микрограмм.
Другие типичные сценарии: 5 мг в 1 мл дают 5 мг/мл, то есть 500 микрограмм на 0,1 мл. При 10 мг в 2 мл получается также 5 мг/мл. Кто работает с более высокими дозировками пептидов, например BPC-157 40 мг, и использует 2 мл воды, получает 20 мг/мл - в каждой десятой миллилитра содержится тогда 2 мг. При 50 мг на 2 мл это 25 мг/мл, то есть 2,5 мг на 0,1 мл.
Шприцы и иглы
Для дозирования пептидных растворов утвердились две системы.
Инсулиновые шприцы - это стандарт. Они вмещают 0,5 или 1 мл, размечены на 100 ИЕ (каждое деление соответствует 0,01 мл), а игла - обычно 29G или 30G - жёстко соединена со шприцем. Преимущество: отсутствует мёртвое пространство, точное дозирование.
Шприцы Luer-Lock с отдельными иглами обеспечивают большую гибкость. Для забора раствора из флакона используется более толстая игла 21G (зелёная). Для подкожной аппликации переходят на более тонкую иглу 27G-30G. Это немного сложнее, но благодаря смене игл инъекционная игла не тупится.
Обзор размеров игл
18G (диаметр 1,27 мм) - имеет смысл только для забора вязких растворов, для инъекций слишком толстая.
21G (0,81 мм) - стандартная игла для забора. Позволяет быстро набрать раствор из флакона.
25G (0,51 мм) - подходит для внутримышечных аппликаций.
27G (0,41 мм) - классика для подкожной аппликации.
29G (0,34 мм) - типичный размер инсулиновой иглы, хороша для подкожного введения.
30G (0,31 мм) - ещё тоньше, минимально инвазивная. Для большинства пептидных применений хороший выбор.
31G (0,26 мм) - самая тонкая распространённая игла. Почти не ощущается, но забор занимает чуть больше времени.
Хранение и гигиена
Правильное хранение имеет решающее значение
Правильное хранение определяет срок годности пептидов. Восстановленные пептиды и вскрытая BacWater должны храниться в холодильнике при 2-8 градусах Цельсия. Лиофилизированные пептиды, которые ещё не были приготовлены, можно хранить при минус 20 градусах Цельсия в морозильнике месяцами.
В целом пептиды следует хранить защищёнными от света - проще всего в оригинальной упаковке или завёрнутыми в алюминиевую фольгу.
К базовому оснащению в плане гигиены относятся спиртовые салфетки с 70 % изопропанолом, нитриловые перчатки и контейнер для острых отходов для использованных игл. Последний часто забывают, но он необходим для безопасной утилизации.
Что вам действительно нужно
Кто только начинает с пептидными исследованиями, нуждается в четырёх вещах: Бактериостатическая вода в качестве растворителя, инсулиновые шприцы (1 мл, 29G или 30G), спиртовые салфетки и одноразовые перчатки. С этим вы полностью оснащены для реконституции и дозирования.
Кто исследует уже давно, разумно дополняет набор шприцами Luer-Lock с отдельными иглами разной толщины, контейнером для острых отходов и, возможно, таблицей дозировок в качестве справочника.
Всегда заказывайте вместе
Бактериостатическую воду всегда заказывайте вместе с пептидами. Мало что может быть более разочаровывающим, чем иметь перед собой Research-Grade пептиды и не иметь под рукой растворителя.