Průvodce rekonstitucí BPC-157: Správná příprava pro výzkumné účely
Podrobný protokol rekonstituce BPC-157: potřebné materiály, výběr rozpouštědla, koncentrace a skladování pro in-vitro výzkum.
BPC-157 je syntetický peptid složený z 15 aminokyselin. V literatuře je popisován jako fragment tzv. "body protection compound" izolovaného ze železniční šťávy. Studován je především v předklinických modelech; spolehlivý klinický data u lidí jsou dosud velmi omezena. Peptid je dodáván jako lyofilizovaný prášek a před použitím v protokolu musí být rekonstituován.
Postup je technicky přímočarý, ale vyžaduje čistou techniku, aby se předešlo kontaminaci nebo ztrátě materiálu. Níže jsou uvedeny potřebné materiály a jednotlivé kroky.
Co budete potřebovat
Připravte si následující materiály: lyofilizovaný BPC-157, bakteriostatická voda (BAC water) nebo sterilní voda, 70% isopropylalkohol tampony, sterilní stříkačky (vhodné jsou 1 ml insulinové stříkačky) a čistý pracovní povrch. Pokud je k dispozici, pomocné je použití laminárního průtokového boxu.
Gastrický pentadekapeptid známý svými výjimečnými regeneračními vlastnostmi. Podporuje hojení ran, angiogenezi a cytoprotekci. Více než 30 let preklinického výzkumu.
Sterilní voda farmaceutické kvality s 0,9% benzylalkoholem (téměř neutrální, ~pH 5,7) - standardní rozpouštědlo pro rekonstituci lyofilizovaných peptidů. Nezbytné příslušenství pro jakýkoli peptidový výzkum. Každá lahvička je uzavřena a připravena k použití.
Postup rekonstituce
Příprava pracovního prostoru
Otřete pracovní povrch důkladně 70% isopropylalkoholem. Použijte laminární průtokový box, pokud je k dispozici. V mnoha laboratořích se nechá peptidová lahvička i rozpouštědlo před zahájením zahřát na pokojovou teplotu, aby se předešlo kondenzaci a zjednodušila manipulace.
Dezinfekce zátek lahviček
Otřete gumové zátky lahvičky BPC-157 i lahvičky s bakteriostatickou vodou alkoholovým tamponem. Nechte je vyschnout na vzduchu po dobu přibližně 30 sekund.
Načtení rozpouštědla
Sterilní stříkačkou načtěte požadovaný objem bakteriostatické vody. Přidáním 2 ml BAC vody do 5 mg lahvičky získáte koncentraci 2,5 mg/ml (2500 mcg/ml).
Přidání rozpouštědla k peptidu
Zaveďte jehlu skrz gumovou zátku a pomalu vstřikujte vodu po vnitřní stěně lahvičky. Nevstřikujte vodu přímo na lyofilizovaný koustyk pod tlakem. Nechte vodu stékat po skleněné stěně a postupně navlhčovat prášek.
Nechte se rozpustit
Položte lahvičku a nechte ji několik minut stát. Prášek se ve většině případů rozpustí sám. Pokud nepatrný materiál zůstává nerozpuštěn, jemně otočte lahvičku mezi prsty.
Kontrola roztoku
Výsledný roztok by měl být čistý bez viditelných částic. Pokud se jeví zakaleným nebo materiál je stále viditelný, nechte ho delší čas stát. Vyhýbejte se energickému protřepávání nebo hrubému míchání.
Neprotřepávejte lahvičku
Energické protřepávání může způsobit pěnění a zbytečný mechanický stres. Pokud zůstává nerozpuštěný materiál, jemně otočte lahvičku mezi prsty nebo nechte delší čas stát.
Běžné koncentrace
Výsledná koncentrace závisí na množství přidaného rozpouštědla.
Pro 5 mg lahvičku: přidáním 1 ml BAC vody získáte 5000 mcg/ml, přidáním 2 ml získáte koncentraci 2500 mcg/ml.
Pro 10 mg lahvičku: 2 ml dají 5000 mcg/ml a 5 ml přinese 2000 mcg/ml.
Zvolte praktickou koncentraci
Vyberte koncentraci, která vyhovuje vašim výpočtům. Poměr 2 ml na 5 mg dává 2500 mcg/ml a je praktická pracovní hodnota, protože z ní lze snadno odvodit objemy.
Skladování
Po rekonstituci by mělo být skladování v souladu se specifikacemi výrobce a daty stability specifického produktu. Bez spolehlivých dat stability pro konkrétní produkt nelze pro rekonstituované roztoky BPC-157 stanovit obecně platnou dobu použitelnosti.
Bakteriostatická voda je vícedávkové ředikovadlo s konzervační látkou. To automaticky neznamená, že každý roztok BPC-157 rekonstituovaný tímto prostředkem zůstává stabilní po dobu stanovené doby. Sterilní voda neobsahuje antimikrobní konzervant a v oficiálním označování je určena jako jednodávkové ředikovadlo; zbytky by měly být urychleně zlikvidovány, pokud označení rekonstituované látky neurčí jinak.
Nerekonstituovaný lyofilizovaný prášek je obecně odolnější než rekonstituovaný roztok. Pro konkrétní doby skladování, chlazeném nebo mraženém skladování byste však měli vycházet z označení výrobce, studií stability nebo interních validačních dat, nikoli z obecných měsíčních pokynů. COA obvykle dokumentuje identitu a čistotu šarže, nikoli spolehlivý údaje o době použitelnosti po rekonstituci.
Vyhýbejte se cyklům mrazení a rozmrazování
Opakované cykly mrazení a rozmrazování mohou ohrozit integritu citlivých peptidů. Pokud mrazíte, postupujte podle zdokumentovaného laboratorního protokolu a rozdělujte na aliquoty pouze tam, kde to podporují vaše data stability nebo SOPs.
Praktické tipy
Zvolte vhodné rozpouštědlo
Zda je vhodná bakteriostatická nebo sterilní voda, závisí na vašem protokolu a specifikacích výrobce pro rozpouštěnou látku. BAC voda je určena jako vícedávkové ředikovadlo, zatímco sterilní voda neobsahuje žádný konzervant.
Ihned označte všechno
Každou lahvičku označte ihned po rekonstituci: název peptidu, koncentrace, ředikovadlo a datum. Neoznačené lahvičky ve sdílené laboratorní lednici snadno vedou k záměně.
Dodržujte přísnou aseptickou techniku po celou dobu
Kontaminovaná lahvička může znehodnotit experiment. Dodržujte přísnou aseptickou techniku po celou dobu: sterilní stříkačky, alkoholem dezinfikované zátky a čistý pracovní povrch.
Naše produkty BPC-157 jsou určeny výhradně pro in-vitro výzkum a laboratorní použití.
Zdroj a kvalita
Ujistěte se, že váš dodavatel poskytuje Certifikát analýzy (COA) od nezávislé testovací laboratoře. Ověření třetí stranou je důležitou součástí zajištění kvality, protože může dokumentovat identitu a čistotu. V PeptidesDirect je každá šarže testována Janoshik Analytical na čistotu i potvrzení identity.
Často kladené otázky
Výzkum v České republice
Pro výzkumníky v České republice se nákup výzkumných peptidů řídí kombinací národní a evropské legislativy.
- Příslušný orgán
- SÚKL (Státní ústav pro kontrolu léčiv) pod evropským dohledem EMA
- DPH
- Česká DPH 21% zahrnuta v ceně
- Dodací lhůta do ČR
- 2 až 4 pracovní dny z našeho EU skladu přes DHL Parcel
Peptidy prodávané pro výzkumné účely nejsou regulovány jako léčivé přípravky podle zákona č. 378/2007 Sb. o léčivech, pokud nejsou činěna žádná terapeutická tvrzení směrem ke koncovému spotřebiteli a prodej je omezen na laboratorní použití. SÚKL se ve svém dohledu zaměřuje především na šedý trh s analogy GLP-1 určenými pro hubnutí, nikoli na malé prodeje mezi laboratořemi výhradně pro vědecké účely. Naše značení produktu výslovně uvádí research-only charakter a každá šarže je identifikována naším barevným systémem místo sériových čísel. Analytický certifikát (CoA) výrobce je poskytnut na vyžádání a doprovází případné celní dotazy.