Guida alla ricostituzione del BPC-157: preparazione corretta per la ricerca
Protocollo di ricostituzione passo dopo passo per BPC-157: materiali necessari, selezione del solvente, concentrazioni e conservazione per la ricerca in vitro.
BPC-157 e un peptide sintetico composto da 15 aminoacidi. In letteratura e descritto come un frammento di un "body protection compound" derivato dal succo gastrico. Viene studiato principalmente in modelli preclinici; dati clinici affidabili nell'uomo rimangono molto limitati ad oggi. Il peptide e fornito come polvere liofilizzata e deve pertanto essere ricostituito prima dell'uso in un protocollo di ricerca.
Il processo e tecnicamente semplice, ma richiede una tecnica pulita per evitare contaminazione o perdita di materiale. Di seguito sono riportati i materiali necessari e i singoli passaggi.
Cosa serve
Preparare i seguenti materiali prima di iniziare: un flaconcino di BPC-157 liofilizzato, acqua batteriostatica (acqua BAC) o acqua sterile, tamponi imbevuti di alcol isopropilico al 70%, siringhe sterili (le siringhe per insulina da 1 ml vanno bene) e una superficie di lavoro pulita. Un banco a flusso laminare e utile se disponibile.
Pentadecapeptide gastrico (15 aminoacidi) noto per le sue eccezionali proprieta di riparazione tissutale. Promuove la guarigione delle ferite, l'angiogenesi e la citoprotezione in tendini, muscoli, intestino e nervi. Oltre 30 anni di ricerca preclinica.
Acqua sterile di grado USP con 0,9% di alcol benzilico - il solvente standard per ricostituire peptidi liofilizzati. Accessorio essenziale per qualsiasi ricerca sui peptidi. Ogni fiala e sigillata e pronta all'uso.
Procedura di ricostituzione
Preparare l'area di lavoro
Pulire accuratamente la superficie di lavoro con alcol isopropilico al 70%. Usare un banco a flusso laminare se disponibile. In molti laboratori si lascia che il flaconcino del peptide e il solvente raggiungano la temperatura ambiente prima di iniziare, per evitare condense e semplificare la manipolazione.
Disinfettare i tappi dei flaconcini
Pulire i tappi in gomma del flaconcino di BPC-157 e dell'acqua batteriostatica con un tampone alcolico. Lasciare asciugare all'aria per circa 30 secondi.
Aspirare il solvente
Usare una siringa sterile per aspirare il volume desiderato di acqua batteriostatica. Aggiungere 2 ml di acqua BAC a un flaconcino da 5 mg produce una concentrazione di 2,5 mg/ml (2500 mcg/ml).
Aggiungere il solvente al peptide
Inserire l'ago attraverso il tappo in gomma e iniettare l'acqua lentamente lungo la parete interna del flaconcino. Evitare di iniettare direttamente sul cake liofilizzato sotto pressione. Lasciare che l'acqua scorra lungo la parete di vetro e inumidisca gradualmente la polvere.
Lasciare sciogliere
Posare il flaconcino e lasciarlo riposare qualche minuto. La polvere si dissolve da sola in molti casi. Se rimane una piccola quantita di materiale non disciolto, ruotare delicatamente il flaconcino tra le dita.
Ispezionare la soluzione
La soluzione finita deve essere limpida senza particelle visibili in sospensione. Se appare torbida o il materiale e ancora visibile, attendere ancora. Evitare di agitare vigorosamente o di mescolare bruscamente.
Non agitare il flaconcino
L'agitazione vigorosa puo causare formazione di schiuma e stress meccanico inutile. Se rimane materiale non disciolto, ruotare delicatamente il flaconcino tra le dita o attendere ancora.
Concentrazioni comuni
La concentrazione risultante dipende da quanto solvente si aggiunge.
Per un flaconcino da 5 mg: aggiungere 1 ml di acqua BAC produce 5000 mcg/ml, mentre 2 ml producono una concentrazione di 2500 mcg/ml.
Per un flaconcino da 10 mg: 2 ml producono 5000 mcg/ml, e 5 ml portano a 2000 mcg/ml.
Scegliere una concentrazione pratica
Scegliere una concentrazione adatta ai propri calcoli. Un rapporto di 2 ml per 5 mg da 2500 mcg/ml ed e un esempio di lavoro pratico perche i volumi possono essere facilmente derivati da esso.
Conservazione
Dopo la ricostituzione, la conservazione deve seguire le specifiche del produttore e i dati di stabilita specifici del prodotto. Senza dati di stabilita affidabili per il prodotto specifico, non e possibile fare una dichiarazione di durata di conservazione generalmente valida per le soluzioni di BPC-157 ricostituite.
L'acqua batteriostatica e un diluente multidose con un conservante. Questo non significa automaticamente che ogni soluzione di BPC-157 ricostituita con essa rimanga stabile per un periodo fisso. L'acqua sterile non contiene conservante antimicrobico ed e descritta nell'etichettatura ufficiale come diluente per dose singola; le quantita residue devono essere eliminate prontamente a meno che l'etichettatura del prodotto della sostanza ricostituita non indichi diversamente.
La polvere liofilizzata non ricostituita e generalmente piu robusta di una soluzione ricostituita. Per le durate di conservazione specifiche, la conservazione refrigerata o congelata, tuttavia, bisogna fare riferimento all'etichettatura del produttore, agli studi di stabilita o ai dati di validazione interni piuttosto che a linee guida mensili generiche. Un COA documenta tipicamente l'identita e la purezza di un lotto, non dati affidabili sulla durata di conservazione dopo la ricostituzione.
Evitare i cicli di congelamento-scongelamento
I cicli ripetuti di congelamento-scongelamento possono compromettere l'integrita dei peptidi sensibili. In caso di congelamento, seguire un protocollo di laboratorio documentato e suddividere in aliquote solo quando supportato dai dati di stabilita o dalle SOPs.
Consigli pratici
Scegliere il solvente appropriato
Se l'acqua batteriostatica o sterile e adatta dipende dal protocollo e dalle specifiche del produttore per la sostanza da sciogliere. L'acqua BAC e progettata come diluente multidose, mentre l'acqua sterile non contiene conservante.
Etichettare tutto immediatamente
Etichettare ogni flaconcino immediatamente dopo la ricostituzione: nome del peptide, concentrazione, diluente e data. I flaconcini non etichettati in un frigorifero di laboratorio condiviso portano facilmente a confusioni.
Mantenere una rigorosa tecnica asettica per tutta la durata del processo
Un flaconcino contaminato puo rendere un esperimento inutilizzabile. Mantenere una rigorosa tecnica asettica per tutta la durata del processo: siringhe sterili, tappi disinfettati con alcol e superficie di lavoro pulita.
I nostri prodotti BPC-157 sono destinati esclusivamente alla ricerca in vitro e all'uso in laboratorio.
Approvvigionamento e qualita
Assicurarsi che il fornitore fornisca un Certificato di Analisi (COA) da un laboratorio di test indipendente. La verifica da parte di terzi e una componente importante dell'assicurazione della qualita perche puo documentare identita e purezza. Presso PeptidesDirect, ogni lotto viene testato da Janoshik Analytical per la purezza e la conferma dell'identita.
Ricerca in Italia
Per i ricercatori in Italia, l'acquisto di peptidi per ricerca avviene in un quadro normativo che integra la legislazione nazionale e quella dell'Unione Europea.
- Autorità competente
- AIFA (Agenzia Italiana del Farmaco), con supervisione europea da parte dell'EMA
- IVA
- IVA italiana al 22% inclusa nel prezzo indicato
- Tempi di consegna in Italia
- 2 a 5 giorni lavorativi dal nostro magazzino UE via DHL; isole e zone remote possono richiedere tempi maggiori
I peptidi destinati alla ricerca non sono regolati come medicinali dal Decreto Legislativo 219/2006 a condizione che non vengano fatte affermazioni terapeutiche verso il consumatore finale e la vendita sia limitata all'uso di laboratorio. L'AIFA si è espressa più volte sul mercato grigio degli analoghi GLP-1 ma non regolamenta direttamente le vendite tra laboratori di piccole quantità a fini esclusivamente scientifici. Il Certificato di Analisi (CoA) del produttore, identificato dal nostro sistema cromatico anziché da numeri di serie, viene fornito su richiesta e accompagna eventuali chiarimenti doganali. Per quesiti accademici raccomandiamo il confronto con il referente farmacologico del proprio istituto.