Przewodnik rekonstytucji BPC-157: prawidłowe przygotowanie do badań
Krok po kroku protokół rekonstytucji BPC-157: potrzebne materiały, wybór rozpuszczalnika, stężenia i przechowywanie do badań in-vitro.
BPC-157 to syntetyczny peptyd składający się z 15 aminokwasów. W literaturze opisywany jest jako fragment tzw. "body protection compound" pochodnego z soku żołądkowego. Badany jest głównie w modelach przedklinicznych; wiarygodne dane kliniczne u ludzi pozostają jak dotąd bardzo ograniczone. Peptyd dostarczany jest w postaci liofilizowanego proszku i musi zostać zrekonstytutowany przed użyciem w protokole badawczym.
Proces jest techniczne prosty, ale wymaga czystej techniki, aby uniknąć kontaminacji lub utraty materiału. Poniżej podano potrzebne materiały i poszczególne kroki.
Co będzie potrzebne
Przygotuj następujące materiały przed rozpoczęciem: liofilizowany fiolek BPC-157, woda bakteriostatyczna (woda BAC) lub woda sterylna, tampony z alkoholem izopropylowym 70%, sterylne strzykawki (dobrze sprawdzają się 1 ml strzykawki insulinowe) i czysta powierzchnia robocza. Komora z przepływem laminarnym jest przydatna, jeśli jest dostępna.
Zoladkowy pentadekapeptyd (15 aminokwasow) znany z wyjatkowych wlasciwosci naprawy tkanek. Wspiera gojenie ran, angiogeneze i cytoprotekcje w scięgnach, miesniach, jelitach i nerwach. Ponad 30 lat badan przedklinicznych.
Sterylna woda klasy USP z 0,9% alkoholem benzylowym (niemal obojetna, ~pH 5,7) - standardowy rozpuszczalnik do rekonstytucji liofilizowanych peptydow. Niezbedne akcesorium do kazdego badania peptydowego. Kazda fiolka jest szczelnie zamknieta i gotowa do uzycia.
Procedura rekonstytucji
Przygotowanie obszaru roboczego
Dokładnie przeczyść powierzchnię roboczą alkoholem izopropylowym 70%. Używaj komory z przepływem laminarnym, jeśli jest dostępna. Wiele laboratoriów pozwala fiolkowi z peptydem i rozpuszczalnikowi osiągnąć temperaturę pokojową przed rozpoczęciem, aby uniknąć kondensacji i ułatwić manipulacje.
Dezynfekcja korków fiolków
Przeczyść gumowe korki fiolka BPC-157 i wody bakteriostatycznej tamponem alkoholowym. Pozwól im wyschnąć na powietrzu przez około 30 sekund.
Nabieranie rozpuszczalnika
Sterylna strzykawka nabierz pożądaną objętość wody bakteriostatycznej. Dodanie 2 ml wody BAC do fiolka 5 mg daje stężenie 2,5 mg/ml (2500 mcg/ml).
Dodanie rozpuszczalnika do peptydu
Wbij igłę przez gumowy korek i wstrzyknij wodę powoli wzdłuż wewnętrznej ściany fiolka. Unikaj wstrzykiwania bezpośrednio na liofilizowany placek pod ciśnieniem. Pozwól wodzie spływać po szklanej ścianie i stopniowo nawilżać proszek.
Pozostawienie do rozpuszczenia
Odstaw fiolek i pozostaw na kilka minut. Proszek w wielu przypadkach sam się rozpuści. Jeśli niewielka ilość materiału pozostaje nierozpuszczona, delikatnie obracaj fiolek między palcami.
Kontrola roztworu
Gotowy roztwór powinien być klarowny bez widocznych unoszących się cząstek. Jeśli wydaje się mętny lub materiał jest nadal widoczny, poczekaj dłużej. Unikaj energicznego wstrząsania lub gwałtownego mieszania.
Nie wstrząsaj fiolkiem
Energiczne wstrząsanie może powodować pienienie i zbędny stres mechaniczny. Jeśli nierozpuszczony materiał pozostaje, delikatnie obracaj fiolek między palcami lub pozostaw na dłużej.
Typowe stężenia
Wynikowe stężenie zależy od ilości dodanego rozpuszczalnika.
Dla fiolka 5 mg: dodanie 1 ml wody BAC daje 5000 mcg/ml, natomiast 2 ml dają stężenie 2500 mcg/ml.
Dla fiolka 10 mg: 2 ml dają 5000 mcg/ml, a 5 ml daje 2000 mcg/ml.
Wybierz praktyczne stężenie
Wybierz stężenie odpowiednie do swoich obliczeń. Stosunek 2 ml na 5 mg daje 2500 mcg/ml i jest praktycznym przykładem roboczym, ponieważ objętości można z niego łatwo wyprowadzić.
Przechowywanie
Po rekonstytucji przechowywanie powinno być zgodne ze specyfikacjami producenta i danymi stabilności specyficznymi dla produktu. Bez wiarygodnych danych stabilności dla konkretnego produktu nie można podać ogólnie ważnego oświadczenia o trwałości dla zrekonstytutowanych roztworów BPC-157.
Woda bakteriostatyczna jest wielodawkowym rozrzedzalnikiem ze środkiem konserwującym. Nie oznacza to automatycznie, że każdy roztwór BPC-157 zrekonstytutowany przy jej użyciu pozostaje stabilny przez określony czas. Woda sterylna nie zawiera konserwantu przeciwdrobnoustrojowego i w oficjalnym oznaczeniu opisana jest jako jednodawkowy rozrzedzalnik; resztkowe ilości należy szybko wyrzucić, chyba że etykieta produktu zrekonstytutowanej substancji mówi inaczej.
Niezrekonstytutowany liofilizowany proszek jest ogólnie bardziej odporny niż zrekonstytutowany roztwór. W przypadku konkretnych długości przechowywania, przechowywania w lodówce lub mrożalni należy jednak polegać na oznaczeniu producenta, badaniach stabilności lub wewnętrznych danych walidacyjnych, a nie na ogólnych miesięcznych wytycznych. COA zwykle dokumentuje tożsamość i czystość partii, a nie wiarygodne dane dotyczące trwałości po rekonstytucji.
Unikaj cykli zamrażania i rozmrażania
Powtarzające się cykle zamrażania i rozmrażania mogą naruszyć integralność wrażliwych peptydów. Jeśli zamrażasz, postępuj zgodnie z udokumentowanym protokołem laboratoryjnym i dziel na aliquoty tylko tam, gdzie jest to poparte danymi stabilności lub SOPs.
Praktyczne wskazówki
Wybierz odpowiedni rozpuszczalnik
Czy woda bakteriostatyczna lub sterylna jest odpowiednia, zależy od Twojego protokołu i specyfikacji producenta dla rozpuszczanej substancji. Woda BAC jest przeznaczona jako wielodawkowy rozrzedzalnik, natomiast woda sterylna nie zawiera konserwantu.
Natychmiast oznacz wszystko
Oznacz każdy fiolek natychmiast po rekonstytucji: nazwa peptydu, stężenie, rozrzedzalnik i data. Nieoznaczone fiolki we wspólnej laboratoryjnej lodówce łatwo prowadzą do pomyłek.
Przez cały czas stosuj ścisłą aseptyczną technikę
Skontaminowany fiolek może sprawić, że eksperyment będzie bezużyteczny. Przez cały czas stosuj ścisłą aseptyczną technikę: sterylne strzykawki, zdezynfekowane alkoholem korki i czysta powierzchnia robocza.
Nasze produkty BPC-157 są przeznaczone wyłącznie do badań in-vitro i użycia laboratoryjnego.
Źródło i jakość
Upewnij się, że Twój dostawca dostarcza Certificate of Analysis (COA) od niezależnego laboratorium testującego. Weryfikacja przez stronę trzecią jest ważnym elementem zapewniania jakości, ponieważ może dokumentować tożsamość i czystość. W PeptidesDirect każda partia jest testowana przez Janoshik Analytical pod kątem czystości i potwierdzenia tożsamości.
Często zadawane pytania
Badania w Polsce
Polscy badacze nabywający peptydy do celów naukowych działają w ramach łączącym regulacje krajowe i prawo Unii Europejskiej.
- Organ regulacyjny
- URPL (Urząd Rejestracji Produktów Leczniczych, Wyrobów Medycznych i Produktów Biobójczych), pod nadzorem europejskiej EMA
- VAT
- Polski VAT 23% wliczony w cenę
- Czas dostawy do Polski
- 3 do 5 dni roboczych z naszego magazynu UE przez DHL Parcel
Peptydy sprzedawane do celów badawczych nie są uregulowane jako produkty lecznicze w rozumieniu polskiej ustawy Prawo farmaceutyczne, o ile nie są kierowane żadne twierdzenia terapeutyczne do konsumenta końcowego, a sprzedaż ogranicza się do zastosowania laboratoryjnego. URPL koncentruje swój nadzór głównie na szarym rynku analogów GLP-1 wykorzystywanych do utraty wagi, a nie na małowolumenowych transakcjach między laboratoriami wyłącznie dla celów naukowych. Każda partia jest oznaczana naszym systemem kolorów zamiast numerów seryjnych, a certyfikat analizy (CoA) producenta jest przekazywany na żądanie i towarzyszy ewentualnym pytaniom celnym.