Руководство по реконституции BPC-157: правильная подготовка для исследований
Пошаговый протокол реконституции BPC-157: необходимые материалы, выбор растворителя, концентрации и хранение для исследований in vitro.
BPC-157 - это синтетический пептид, состоящий из 15 аминокислот. В литературе он описывается как фрагмент так называемого "body protection compound", полученного из желудочного сока. Изучается преимущественно в доклинических моделях; надёжные клинические данные у людей остаются очень ограниченными на сегодняшний день. Пептид поставляется в виде лиофилизированного порошка и поэтому должен быть реконституирован перед использованием в протоколе исследования.
Процесс технически прост, но требует чистой техники, чтобы избежать загрязнения или потери материала. Ниже приводятся необходимые материалы и отдельные этапы.
Что вам понадобится
Подготовьте следующие материалы перед началом: лиофилизированный флакон BPC-157, бактериостатическую воду (вода BAC) или стерильную воду, салфетки с 70% изопропиловым спиртом, стерильные шприцы (хорошо подходят инсулиновые шприцы объёмом 1 ml) и чистую рабочую поверхность. Ламинарная бокс-кабина полезна, если она имеется.
Гастропентадекапептид для исключительного восстановления тканей. Способствует заживлению ран, ангиогенезу, цитопротекции. Более 30 лет исследований.
Стерильная вода фармакопейного качества с 0,9% бензилового спирта (почти нейтральная, ~pH 5,7) - стандартный растворитель для восстановления лиофилизированных пептидов. Незаменимый аксессуар. Каждый флакон герметично запечатан и готов к использованию.
Процедура реконституции
Подготовка рабочей зоны
Тщательно протрите рабочую поверхность 70% изопропиловым спиртом. Используйте ламинарную бокс-кабину, если она имеется. Во многих лабораториях пептидный флакон и растворитель оставляют при комнатной температуре перед началом, чтобы избежать конденсации и упростить обращение.
Дезинфекция пробок флакона
Протрите резиновые пробки флакона BPC-157 и бактериостатической воды салфеткой со спиртом. Оставьте их сушиться на воздухе около 30 секунд.
Набор растворителя
Стерильным шприцем наберите желаемый объём бактериостатической воды. Добавление 2 ml воды BAC в флакон 5 mg даёт концентрацию 2,5 mg/ml (2500 mcg/ml).
Добавление растворителя к пептиду
Введите иглу через резиновую пробку и вводите воду медленно вдоль внутренней стенки флакона. Избегайте введения непосредственно на лиофилизированный осадок под давлением. Пустите воду стекать по стеклянной стенке и постепенно увлажнять порошок.
Оставьте раствориться
Поставьте флакон и оставьте на несколько минут. Порошок растворится сам по себе во многих случаях. Если небольшое количество материала остаётся нерастворённым, осторожно катайте флакон между пальцами.
Инспекция раствора
Готовый раствор должен быть прозрачным без видимых плавающих частиц. Если он выглядит мутным или материал ещё виден, подождите больше времени. Избегайте энергичного встряхивания или грубого перемешивания.
Не встряхивайте флакон
Энергичное встряхивание может вызвать пенообразование и ненужное механическое воздействие. Если нерастворённый материал остаётся, осторожно катайте флакон между пальцами или дайте больше времени.
Обычные концентрации
Получаемая концентрация зависит от того, сколько растворителя добавляется.
Для флакона 5 mg: добавление 1 ml воды BAC даёт 5000 mcg/ml, а 2 ml дают концентрацию 2500 mcg/ml.
Для флакона 10 mg: 2 ml дают 5000 mcg/ml, а 5 ml приводит к 2000 mcg/ml.
Выбирайте практическую концентрацию
Выбирайте концентрацию, подходящую для ваших расчётов. Соотношение 2 ml на 5 mg даёт 2500 mcg/ml и является практическим рабочим примером, так как объёмы можно легко из неё вывести.
Хранение
После реконституции хранение должно соответствовать спецификациям производителя и данным стабильности, специфическим для продукта. Без надёжных данных стабильности для конкретного продукта невозможно дать общезначимое заявление о сроке хранения для реконституированных растворов BPC-157.
Бактериостатическая вода является многоразовым разредителем с консервантом. Это не означает автоматически, что каждый раствор BPC-157, реконституированный с ней, остаётся стабильным в течение определённого периода. Стерильная вода не содержит антимикробного консерванта и описана в официальной маркировке как одноразовый разредитель; остаточные количества следует быстро выбросить, если маркировка продукта реконституированного вещества не указывает иначе.
Нереконституированный лиофилизированный порошок в целом более устойчив, чем реконституированный раствор. Для конкретных сроков хранения, охлаждённого или замороженного хранения, однако, следует опираться на маркировку производителя, исследования стабильности или внутренние валидационные данные, а не на общие ежемесячные рекомендации. COA обычно документирует идентичность и чистоту партии, а не надёжные данные о сроке годности после реконституции.
Избегайте циклов заморозки-разморозки
Повторяющиеся циклы заморозки-разморозки могут нарушить целостность чувствительных пептидов. Если замораживаете, следуйте документированному лабораторному протоколу и разделяйте на аликвоты только там, где это поддерживается вашими данными стабильности или SOPs.
Практические советы
Выбирайте подходящий растворитель
Подходит ли бактериостатическая или стерильная вода зависит от вашего протокола и спецификаций производителя для растворимого вещества. Вода BAC разработана как многоразовый разредитель, тогда как стерильная вода не содержит консерванта.
Сразу маркируйте всё
Маркируйте каждый флакон сразу после реконституции: название пептида, концентрация, разредитель и дата. Немаркированные флаконы в общем лабораторном холодильнике легко приводят к путанице.
Соблюдайте строгую асептическую технику на протяжении всего процесса
Загрязнённый флакон может сделать эксперимент непригодным для использования. Соблюдайте строгую асептическую технику на протяжении всего процесса: стерильные шприцы, дезинфицированные спиртом пробки и чистая рабочая поверхность.
Наши продукты BPC-157 предназначены исключительно для исследований in vitro и лабораторного использования.
Источник и качество
Убедитесь, что ваш поставщик предоставляет Сертификат Анализа (COA) от независимой испытательной лаборатории. Верификация третьей стороной является важным компонентом обеспечения качества, так как она может документировать идентичность и чистоту. В PeptidesDirect каждая партия тестируется Janoshik Analytical как на чистоту, так и на подтверждение идентичности.
Часто задаваемые вопросы
Исследования в России и СНГ
Для русскоязычных исследователей в России и странах СНГ приобретение исследовательских пептидов из ЕС сопряжено с международной таможенной логистикой.
- Регулирующий орган
- Росздравнадзор (Федеральная служба по надзору в сфере здравоохранения) в РФ; в странах СНГ соответствующие национальные службы (Минздрав РК, ГП «Государственный экспертный центр Минздрава Украины» и т.д.)
- Налоги и пошлины
- Стоимость не включает российский НДС 20% и возможные таможенные пошлины при ввозе; они оплачиваются получателем
- Сроки доставки
- 7 - 14 рабочих дней международной доставкой; время прохождения таможни зависит от региона
Пептиды для исследовательских целей не регулируются как лекарственные средства по Федеральному закону № 61-ФЗ «Об обращении лекарственных средств» при условии, что не делаются терапевтические заявления конечному потребителю и продажа ограничена лабораторным применением. Росздравнадзор сосредотачивает надзор главным образом на сером рынке аналогов GLP-1 для снижения веса, а не на малых объёмах продаж между лабораториями исключительно для научных целей. Каждая партия идентифицируется нашей цветовой системой вместо серийных номеров; сертификат анализа (CoA) производителя предоставляется по запросу и сопровождает таможенные запросы. Получатель отвечает за корректное оформление международной посылки на таможне.